白月,栾凤侠,王珣.小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限[J].麦类作物学报,2009,29(2): |
小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限 |
Detection Limits of PCR and Realtime PCR for Genetically Modified Components in Transgenic Wheat |
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DOI:10.7606/j.issn.1009-1041.2009.02.042 |
中文关键词: 转基因小麦 实时荧光PCR 绝对检测低限 相对检测低限 |
英文关键词:PCR |
基金项目:国家质检总局科研项目,科技部社会公益研究专项重点项目子课题,国家标准委下达的国家标准制定项目? |
白月 栾凤侠 王珣 |
白月,栾凤侠,BAI Yue,LUAN Feng-xia(黑龙江出入境检验检疫局,黑龙江哈尔滨,150001) ;王珣,WANG Xun(黑龙江省农业科学院生物技市研究所,黑龙江哈尔滨,150086) ? |
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中文摘要: |
为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分剐进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用于测定绝对检测低限,并应用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和肌Wx012、GAG56D内源基因的引物和探针时模板DNA分别进行PCR与实时荧光PCR扩增.结果表明,最终确定PCR方法检测小麦转基因成分的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.5 ng/ⅡL;实时荧光PCR方法的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.01 ng/μL.所确定的检测低限可满足国家对转基因产品的最低标识要求. |
英文摘要: |
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