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陈军营,朱雪萍,尹海燕,程西永,许海霞,陈新建.小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5基因在大肠杆菌中的表达[J].麦类作物学报,2007,27(4):597
小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5基因在大肠杆菌中的表达
Expression of Wheat HMW-GS 1Dx5 Gene in E. coli
  修订日期:2007-03-05
DOI:10.7606/j.issn.1009-1041.2007.04.143
中文关键词:  小麦  高分子量谷蛋白亚基  大肠杆菌  表达  小麦品种  高分子量  蛋白亚基  基因产物  转化大肠杆菌  表达条件  Gene  Wheat  Expression  初始浓度  菌液浓度  培养基成分  结果  诱导时间  检测  Western  blot  迁移率  相似  IPTG
英文关键词:High molecular weight glutenin subunits  E. coli  Expression
基金项目:河南省高校杰出科研创新人才工程项目
陈军营  朱雪萍  尹海燕  程西永  许海霞  陈新建
河南农业大学农学院,河南郑州450002
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中文摘要:
      为了给小麦优质亚基研究奠定基础,将高分子量谷蛋白亚基1Dx5基因的核苷酸序列与载体pRSET A重组,将构建好的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,通过IPTG使其得到了成功表达.大肠杆菌中表达的1Dx5亚基在SDS-PAGE上与小麦品种钱尼中的1Dx5亚基具有相似的迁移率.用Western blot技术成功检测到了目的基因产物.通过改变IPTG浓度、诱导时间、培养基成分及初始菌液浓度研究了最适表达条件.结果表明,最适表达条件为:LB培养基,菌液初始浓度(OD600)0.4~0.6,IPTG浓度0.4mmol/L,诱导时间为3~5 h.
英文摘要:
      Nucleotide acid sequence of HMW-Glu 1Dx5 gene was recombined with the expression vector pRSET A,then the chimaeric gene was transformed into the E.coli strain BL21(DE3) pLysS.The transgenic cells expressed Glu-1Dx5 successively when they were induced by I
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