陈军营,朱雪萍,尹海燕,程西永,许海霞,陈新建.小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5基因在大肠杆菌中的表达[J].麦类作物学报,2007,27(4):597 |
小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5基因在大肠杆菌中的表达 |
Expression of Wheat HMW-GS 1Dx5 Gene in E. coli |
修订日期:2007-03-05 |
DOI:10.7606/j.issn.1009-1041.2007.04.143 |
中文关键词: 小麦 高分子量谷蛋白亚基 大肠杆菌 表达 小麦品种 高分子量 蛋白亚基 基因产物 转化大肠杆菌 表达条件 Gene Wheat Expression 初始浓度 菌液浓度 培养基成分 结果 诱导时间 检测 Western blot 迁移率 相似 IPTG |
英文关键词:High molecular weight glutenin subunits E. coli Expression |
基金项目:河南省高校杰出科研创新人才工程项目 |
陈军营 朱雪萍 尹海燕 程西永 许海霞 陈新建 |
河南农业大学农学院,河南郑州450002 |
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中文摘要: |
为了给小麦优质亚基研究奠定基础,将高分子量谷蛋白亚基1Dx5基因的核苷酸序列与载体pRSET A重组,将构建好的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,通过IPTG使其得到了成功表达.大肠杆菌中表达的1Dx5亚基在SDS-PAGE上与小麦品种钱尼中的1Dx5亚基具有相似的迁移率.用Western blot技术成功检测到了目的基因产物.通过改变IPTG浓度、诱导时间、培养基成分及初始菌液浓度研究了最适表达条件.结果表明,最适表达条件为:LB培养基,菌液初始浓度(OD600)0.4~0.6,IPTG浓度0.4mmol/L,诱导时间为3~5 h. |
英文摘要: |
Nucleotide acid sequence of HMW-Glu 1Dx5 gene was recombined with the expression vector pRSET A,then the chimaeric gene was transformed into the E.coli strain BL21(DE3) pLysS.The transgenic cells expressed Glu-1Dx5 successively when they were induced by I |
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